百迪超級(jí)轉(zhuǎn)染試劑（替代Lipo6666）0.25ml
- 品名： 百迪超級(jí)轉(zhuǎn)染試劑（替代Lipo6666）0.25ml
- 型號(hào)： A524-025
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | 一、細(xì)胞準(zhǔn)備（以 24 孔板為例） 貼壁細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一天，胰酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)，按照每孔 2-8×105個(gè)細(xì)胞的量進(jìn)行鋪板，使 其在轉(zhuǎn)染時(shí)密度為 80-100%。 懸浮細(xì)胞：轉(zhuǎn)染當(dāng)天，配制 DNA 復(fù)合物之前，24 孔板中細(xì)胞鋪板，每 500μL 生長培養(yǎng)基中 加入 4-10×105 細(xì)胞。 * 鋪板時(shí)可使用抗生素，但轉(zhuǎn)染時(shí)候切記移除抗生素。 * 高細(xì)胞密度仍具高轉(zhuǎn)染效率，建議細(xì)胞密度大于 90%。 二、轉(zhuǎn)染復(fù)合物的配置： 1. 使用 50μL 無血清培養(yǎng)基（如 DMEM 或 Opti-MEM 培養(yǎng)基）稀釋 0.5μg DNA，渦旋混 勻。 2. 使用 50μL 無血清培養(yǎng)基（如 DMEM 或 Opti-MEM 培養(yǎng)基）稀釋 0.6-2.5μL 轉(zhuǎn)染試劑。 轉(zhuǎn)染試劑稀釋后室溫孵育 2-5 min（在 30 min 內(nèi)同稀釋的 DNA 混合，保溫時(shí)間過長會(huì) 降低活性）。 * 如果 DMEM 作為脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑的稀釋液，必須在 5 min 內(nèi)同稀釋的 DNA 混合。 * 轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類型及其他實(shí)驗(yàn)條件影響，建議初次使用時(shí)設(shè)置梯度優(yōu)化最佳使用 量。 三、細(xì)胞轉(zhuǎn)染： 1. 混合稀釋的 DNA 和稀釋的轉(zhuǎn)染試劑（總體積 100μL），輕輕混勻，并在室溫孵育 20min。此時(shí)溶液可能會(huì)混濁，但不會(huì)影響轉(zhuǎn)染。DNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物室溫至少穩(wěn)定保 存 5h。 2. 將 100μL DNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物滴加到 24 孔細(xì)胞板中（細(xì)胞板中培養(yǎng)基為 400μL），輕 輕晃動(dòng)細(xì)胞板混勻。 * 如需無血清條件轉(zhuǎn)染，加入復(fù)合物前將含血清培養(yǎng)基替換為無血清培養(yǎng)基即可。 3. 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 18-48 h，直至進(jìn)行轉(zhuǎn)基因表達(dá)分析，無需去掉復(fù)合物或更換 培養(yǎng)基。如需要，可在轉(zhuǎn)染后 4-6 h 后更換生長培養(yǎng)基，不會(huì)降低轉(zhuǎn)染效率。 |
| 注意事項(xiàng) | 1. 本產(chǎn)品可用于有血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)染，并且轉(zhuǎn)染前后不需要換培養(yǎng)基。但是，制備轉(zhuǎn)染復(fù)合 物時(shí)要求用無血清培養(yǎng)基稀釋 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑，因?yàn)檠鍟?huì)影響復(fù)合物的形成。 2. 高細(xì)胞密度仍具高轉(zhuǎn)染效率，建議細(xì)胞密度大于 90%，有利獲得更高的蛋白表達(dá)。 3. 鋪板時(shí)可使用抗生素，但轉(zhuǎn)染時(shí)應(yīng)換液將抗生素移除。 4. 使用高純度的 DNA 或 RNA 有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率，并去除內(nèi)毒素。 5. 本產(chǎn)品置于 4 度保存，不可冷凍。避免反復(fù)或長時(shí)間開蓋，避免脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效 率。 6. 初次使用建議優(yōu)化 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑用量以獲得最佳轉(zhuǎn)染效率。DNA 和轉(zhuǎn)染試劑的比例， 通常推薦是 1:2-1:3，例如使用 0.5 μg DNA 和 1-1.5 μL 轉(zhuǎn)染試劑。可根據(jù)試劑情況進(jìn)行 優(yōu)化調(diào)整。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 2-8℃保存，有效期 24 個(gè)月。 |
產(chǎn)品詳情
BDBIO 超級(jí)轉(zhuǎn)染試劑（替代 Lipo6666）是一種新型高效的陽離子聚合物。它可以與核酸 （包括質(zhì)粒、siRNA、寡聚核苷酸）相互作用形成一種復(fù)合物將核酸轉(zhuǎn)運(yùn)到真核細(xì)胞內(nèi)，適 用于大部分真核細(xì)胞的細(xì)胞轉(zhuǎn)染，對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞表現(xiàn)出更大優(yōu)勢(shì)。本產(chǎn)品細(xì)胞毒性低，轉(zhuǎn)染 后可不換液，也可在 4-6 小時(shí)后更換新鮮培養(yǎng)基。對(duì)高密度細(xì)胞保持高轉(zhuǎn)染效率，在細(xì)胞密 度 90%以上仍具有很高的轉(zhuǎn)染效率。血清不影響轉(zhuǎn)染效率，可將轉(zhuǎn)染復(fù)合物直接加入完全培 養(yǎng)基中，可減少去除血清對(duì)細(xì)胞的損傷。用量少，通常情況下對(duì)于 24 孔板轉(zhuǎn)染，每次用 1- 2μL，1mL 可做 500-1000 次轉(zhuǎn)染；對(duì)于 6 孔板，每次用 4-8μL，1mL 約可做 125-250 次 轉(zhuǎn)染。
暫無內(nèi)容...
