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百迪人膀胱移行細胞 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶

品名: 百迪人膀胱移行細胞 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶
品牌: 百迪生物
型號: C5088
  • 產品詳情
  • 規(guī)格參數

產品概述 來源 膀胱  形態(tài) 貼壁、上皮樣胞樣  培養(yǎng) 89%DMEM+10%FBS+1%P/S 37℃ 5%CO2  傳代 0.25%胰蛋白酶消化6min左右,比例1:2-1:4  產品簡介 人膀胱移行癌細胞(human bladder cancer cells) J82細胞來源于一名58歲白人男性的膀胱癌上皮細胞。該細胞貼壁,成上皮樣。J82細胞可用于膀胱癌的生物學研究、抗癌藥物篩選與藥物抑癌機理研究等方向。  收貨指南 1. T25細胞瓶到貨后處理方案:

(1) 驗貨:培養(yǎng)瓶上標簽、培養(yǎng)瓶完好性以及瓶口是否有漏液;

(2) 處置:75%酒精對培養(yǎng)瓶消毒后,放入37℃,5% CO2的培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)2-4小時后,進行顯微觀察、拍照,作為售后維權依據;

(3)注意:貼壁細胞在運輸過程中發(fā)生細胞脫落,這是正常現象,靜置后可恢復貼壁。

2. 凍存管到貨后處理方案:

(1) 驗貨:包裝的標簽、包裝內是否有干冰、凍存管完好性;

(2) 處置:盡快復蘇(見培養(yǎng)方法)或程序降溫后轉移至液氮中保存。

  培養(yǎng)方法 1.培養(yǎng)基:

89% DMEM 培養(yǎng)基;10% 胎牛血清(FBS);1%青霉素-鏈霉素(P/S)。

2. 復蘇:

(1)解凍:用鑷子將凍存管浸于37 ℃水?。环磸蛽u晃,迅速完成解凍;

(2)離心:噴灑75%酒精消毒后,在無菌環(huán)境下,打開凍存瓶,用移液器將細胞連同凍存液移至含1 mL完全培養(yǎng)基的10 mL離心管中,室溫1200 rpm離心3-5 min,細胞沉于離心管底部;

(3)培養(yǎng):將上清液輕輕棄去,加2 mL完全培養(yǎng)基,輕柔懸起細胞,然后將所有細胞懸液移至含有3 mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中,于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

(4)觀察:每日觀察細胞生長狀態(tài)(培養(yǎng)基顏色、細胞貼壁情況、形態(tài)與密度等)并拍照。

3. 傳代:

細胞密度達80%-90%開始傳代

(1)清洗:無菌下吸出培養(yǎng)基,用37 ℃預熱的PBS清洗一次;拿回超凈臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1 mL完全培養(yǎng)基終止消化

(2)消化:加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液,轉動培養(yǎng)瓶令其浸潤所有細胞,室溫(或37 ℃)消化,顯微鏡下觀察到細胞大部分變圓并脫落,迅速;

(3)離心:用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉移至10 mL離心管中,在1200 rpm離心3-5 min;

(4)培養(yǎng):無菌下棄上清液,加1 mL完全培養(yǎng)基懸起細胞并移至T25培養(yǎng)瓶中;按1∶2 - 1∶4比例添加完全培養(yǎng)基,用移液器輕柔吹勻后,分裝至培養(yǎng)瓶中,于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。  生物安全等級 1 請在無菌環(huán)境中操作,避免污染; 為了保護細胞的穩(wěn)定性,細胞傳代次數不宜過多; 為了結果的可靠性,實驗前請確認細胞狀態(tài)良好; 嚴格遵守生物安全操作規(guī)程。  免責聲明 本產品僅用于科研目的,不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應遵循國家和地區(qū)的法律法規(guī),自行承擔使用本產品所產生的一切風險和責任。 請在使用前仔細閱讀本說明書,并按照指導操作。如有任何疑問或需要進一步信息,請與我們聯系。    產品詳情


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