| 本制品是從全血中提取適合各種實(shí)驗(yàn)用的高純度DNA的試劑盒。標(biāo)準(zhǔn)的操作規(guī)程是使用100 μl 的血液量，但實(shí)際操作時(shí)也可以處理更多量的血液。本試劑盒含有GenTLE Solution I、II、III三種溶液。其中GenTLE Solution I 的作用是在破壞血細(xì)胞的同時(shí)，與核酸形成電中性的復(fù)合體。將該復(fù)合體離心收集并用GenTLE Solution II 清洗后，在沉淀中加入GenTLE Solution III，將DNA分離出來，然后再加入異丙醇將DNA沉淀回收。整個(gè)操作只需40分鐘左右，便可提取高純度的DNA，操作十分簡(jiǎn)單方便。由于GenTLE Solution I 具有破壞菌體和病毒粒子的作用，這對(duì)于處理那些擔(dān)心有可能發(fā)生病源菌等污染的樣品非常有利。而且GenTLE Solution I 與核酸生成的復(fù)合體牢固、穩(wěn)定，便于樣品的運(yùn)輸以及大量樣品的處理。本試劑盒既適用于尚未凝固的全血，又適用于經(jīng)各種抗凝劑 (檸檬酸、EDTA、肝素) 處理過的全血，無論經(jīng)過哪種抗凝劑處理，每100 μl 人的血液都能得到1 μg 以上的 DNA，其純度A260/A280可達(dá)1.8～2.0。提取的DNA可用于PCR擴(kuò)增和限制酶切等實(shí)驗(yàn)。 ■ 保存室溫*。* GenTLE Solution I 和GenTLE Solution II 在20℃以下時(shí)有可能產(chǎn)生沉淀。此時(shí)，請(qǐng)按照注意事項(xiàng)1.和2.中所介紹的方法使沉淀完全溶解后使用。 ■ 實(shí)驗(yàn)操作流程圖 ■ 注意事項(xiàng)1. GenTLE Solution I 保存于20℃以下時(shí)，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)沉淀，所以最好于20℃以上保存。如出現(xiàn)沉淀，可在50℃～55℃加熱1～2小時(shí)，使沉淀完全溶解后使用。但是請(qǐng)注意， 60℃以上加熱時(shí)，性能可能會(huì)有所下降。2. GenTLE Solution II 出現(xiàn)沉淀時(shí)，請(qǐng)離心取上清使用。3. GenTLE Solution I 有引起燒傷的危險(xiǎn)。一旦濺入眼中或觸到皮膚上，請(qǐng)立即用大量水沖洗。4. 氣溫低時(shí)，GenTLE Solution I 的粘度增大，有時(shí)較難吸取，此時(shí)請(qǐng)于37℃加熱數(shù)分鐘后使用。5. 為防止污染，分裝時(shí)請(qǐng)使用新的滅過菌的Tip。6. DNA的收量，會(huì)因抗凝劑的種類以及血液的保存條件的不同而各異。使用之前請(qǐng)務(wù)必閱讀“采血后樣品的處理、保存和DNA收量”部分。7. 檸檬酸、EDTA、肝素三種抗凝劑均可使用。但肝素對(duì)酶反應(yīng)有可能起阻害作用，采血時(shí)如沒有特殊要求，請(qǐng)使用檸檬酸或EDTA處理血樣。8. 提取后的DNA，請(qǐng)用TE溶解，溶解后的DNA冷凍或4℃保存都可以。但如果用滅菌蒸餾水溶解，請(qǐng)務(wù)必冷凍保存，以防止DNA分解。 |
